• 生物活性物质分离纯化器、层析柱

    层析(chromatography),又称制备级色谱或色层分离,是生物分离纯化中精度很高的一种单元操作。

    层析的成功与否,在很大程度上取决于所使用的层析介质。各种raybet竞彩,包括天然高分子raybet竞彩、合成高分子raybet竞彩和各种复合raybet竞彩,已经成为最重要的层析介质。 良好的raybet竞彩介质应该具备下列性质:
    (1)良好的机械稳定性 在装柱过程(常常需要施加一定外压)中能够保证颗粒完整,在装柱后承受液体的压力,不发生破碎和变形;同时,能够保证很好的流速范围,减少层析柱的压力降,以减少料液输送的能耗和昂贵的耐压材料、密封件的使用。
    (2)良好的化学稳定性 能够耐受溶液的酸碱环境和各种试剂,不发生溶解或分离性能的改变。
    (3)良好的生物稳定性 不能被生物和各种酶所破坏。
    (4)良好的孔道选择性 能够根据被分离原料中各组分的分子尺寸进行选择,使不同大小的组分在进入介质孔道时得以筛分;不能进入任何孔道的最大分子最先透过层析柱,依次透过的顺序为分子由最大到最小;这就是分子筛过滤层析,或称凝胶过滤、尺寸排阻层析。
    (5)良好的吸附选择性 在进行前面提到的尺寸排阻层析时介质本身应该是完全惰性,不与任何组分吸附,以确保单纯的孔道选择性;而依靠吸附来选择时,则仅仅对目标组分进行分离。另一种理想的吸附选择性是各个组分与介质的吸附强度不同,可以由一种洗脱液按照吸附的强度,按照先弱后强的次序将不同组分洗脱下来。
    (6)较高的分离容量 单位体积层析柱内能提供最大的比表面积,或最大的空隙率,或最大的吸附密度,以使介质的用量最低、层析柱的尺寸最小。
    (7)对被分离产物的友好性 不应在与目标组分作用的过程中,使组分的活性丧失,或者由于介质本身的缺陷和不均一性导致一部分产物的不可逆吸附或变性。

    raybet竞彩的尺寸、骨架、孔道、吸附基团等对层析的结果至关重要。就尺寸而言,生物活性物质层析要求至少大于5um,因为尺寸越小,层析柱的压力降越高。事实上,5—10um的raybet竞彩是高效液相层析的填料,需要昂贵的HPLC设备;尺寸在40-200um的raybet竞彩常常用于蛋白质的分离纯化,因为这个尺寸范围的raybet竞彩填充层析柱后不需要很高的压力就可以操作,适合使用相对便宜的层析系统。

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